生物實驗室怎么防止氣溶膠污染？

目前可確定的新冠肺炎傳播途徑主要為直接傳播、氣溶膠傳播、結(jié)婚粗傳播。那么生物實驗室如何防止氣溶膠污染？南寧銘力凈化工程為您詳解PCR實驗室的氣溶膠污染防范要點。

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   2. 微生物實驗室裝修設(shè)計之平面布局規(guī)范：生命科學(xué)/食品衛(wèi)生/醫(yī)療

   3. PCR實驗室設(shè)計裝修怎么做？生命科學(xué)實驗室基因擴(kuò)增實驗室

   4. PCR實驗室和P2實驗室的區(qū)別和裝修要點

   PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展使得疾病診斷得到更有效的證據(jù)，尤其是熒光定量PCR的推廣與應(yīng)用，大大提高了檢測的靈敏性及準(zhǔn)確性。然而隨著該項技術(shù)在病原檢測實驗室的廣泛應(yīng)用，PCR實驗室的氣溶膠污染問題逐漸引起人們關(guān)注。為了有效地避免PCR實驗室DNA/RNA氣溶膠污染,獲得穩(wěn)定、可靠的檢驗結(jié)果，防止出現(xiàn)假陽性，PCR實驗室要建立嚴(yán)格的防污染措施和相應(yīng)的污染監(jiān)測體系來防范氣溶膠污染污染，一旦發(fā)現(xiàn)氣溶膠污染，要及時查找原因，并相應(yīng)解決污染問題。

一、實驗室氣溶膠污染及其來源

   氣溶膠污染是指實驗室在長期運行中，PCR產(chǎn)物不斷積聚，附著在空氣中的顆粒中，并懸浮于氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系，造成PCR檢驗的結(jié)果發(fā)生改變。

   二、實驗室氣溶膠防范措施

   1. 實驗室分區(qū)

   PCR實驗室應(yīng)該按照2002 年公布的《臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室管理暫行辦法》及《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床擴(kuò)增實驗室管理辦法》 （衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號）規(guī)定分為四區(qū)，分別是試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)，前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，同時配備通風(fēng)與凈化，形成科室之間的壓差。工作流程，包括實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本處理區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動。嚴(yán)禁在潔凈走廊反向，同時在各科室、相應(yīng)緩沖間及潔凈走廊之間形成不同梯度的壓差，使空氣流動與工作方向相同。

工作流向及空氣流動方向

   2. 設(shè)置對照

   每次實驗前均準(zhǔn)備兩個陰性對照（均以水作為模板，一個與樣品參與核酸提取，另一個不參與提取，僅在配置擴(kuò)增體系時加入），以便對實驗室氣溶膠污染情況進(jìn)行監(jiān)測，判斷有無污染，是什么原因造成的污染，以便采取措施，防止和消除污染。同時要設(shè)定一個陽性對照，用于監(jiān)測實驗結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

   3. 實驗室氣溶膠監(jiān)測

   采用家用空氣凈化器定期對實驗室空氣進(jìn)行凈化，將凈化器中的過濾網(wǎng)浸入水中，混勻后，以混合后的水作為樣品進(jìn)行相應(yīng)檢測，以便及時了解空氣中氣溶膠的污染情況。定期采集移液槍、提取 儀、擴(kuò)增儀等儀器內(nèi)部及表面的棉拭子樣品進(jìn)行檢測，以便了解實驗儀器中的污染情況。

   4. 嚴(yán)格的工作流程

   PCR各個科室分別配備各自的工作服，可以以顏色區(qū)分，進(jìn)入各科室必須更換相應(yīng)的工作服；同時在潔凈走廊入口配備PCR室專用鞋，進(jìn)入必須更換，各科室前配備氈墊。潔凈走廊中實驗室人員只能從試劑準(zhǔn)備區(qū)方向前往結(jié)果分析區(qū)方向，在條件允許的情況下各科室分別配備不同的人員進(jìn)行操作，避免各科室人員互相竄動。

   5. 加強(qiáng)清潔與消毒

   做好實驗室的清潔及消毒工作是防止實驗室內(nèi)發(fā)生氣溶膠污染的有效途徑。實驗室的清潔范圍包括工作臺面（試驗臺、超凈臺和存儲柜等）、儀器設(shè)備表面（離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭、提取DNA用的加熱塊、擴(kuò)增儀的樣品槽、移液器桿的吸孔、遺傳分析儀的加樣槽等）、重復(fù)使用的工具或器皿等的清潔。

實驗開始前后，先用新鮮配制的10%的次氯酸鈉溶液將上述區(qū)域及儀器的表面反復(fù)擦拭，再用75%乙醇擦洗以去除殘留物，待酒精揮發(fā)后方可進(jìn)行試驗。這樣可以有效清除它們表面附著的各種污染物。同時定期對實驗室進(jìn)行紫外燈照射消毒。

  6. 提高實驗室人員規(guī)范操作意識

  定期組織實驗室人員進(jìn)行防污染安全培訓(xùn)，宣講PCR實驗室操作規(guī)范，印發(fā)并講解《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床擴(kuò)增實驗室管理辦法》（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號）、《關(guān)于做好血站核酸檢測工作的通知》（國衛(wèi)辦醫(yī)發(fā)〔2015〕11號）、《血站核酸檢測實驗室質(zhì)量保證指南》、 《法庭科學(xué)DNA實驗室規(guī)范》（GA/T382-2002）、《法庭科學(xué)DNA實驗室檢驗規(guī)范》（GA/T383-2002）等文件。

實驗室氣溶膠污染是現(xiàn)階段實驗室運行中最重要的防范方向，除了上述防范措施之外，實驗室要定期進(jìn)行去除核酸的操作，同時將質(zhì)量為先，數(shù)量次之，否則一旦出現(xiàn)氣溶膠污染，實驗室將無法繼續(xù)運行。氣溶膠污染的結(jié)果會影響實驗室檢測結(jié)果的質(zhì)量，降低檢測結(jié)果的使用價值，嚴(yán)重時會造成疾病判斷的誤判或錯判，不能及時處理臨床疾病，導(dǎo)致嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。實驗室一旦發(fā)現(xiàn)有氣溶膠污染的存在，必須認(rèn)真查找污染源，分析造成的原因，并針對原因提出相應(yīng)的解決方案，同時還要對這一時期獲得的檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行復(fù)核，查找是否存在未被發(fā)現(xiàn)的污染情況

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